Полимераздык чынжыр реакциясы, кыскартылганПЦРанглисче, белгилүү бир ДНК фрагменттерин күчөтүү үчүн колдонулган молекулярдык биология ыкмасы.Аны дененин сыртында өзгөчө ДНК репликациясы катары кароого болот, ал ДНКнын өтө аз көлөмүн абдан көбөйтө алат.БүтүндөйПЦРреакция процессинде заттардын бир классы маанилүү роль ойнойт - ферменттер.
1. Так ДНК
Алгачкы күндөрү эксперименттердеПЦР, Окумуштуулар Escherichia coli ДНК полимераза I колдонушкан, Бирок бул ферментте бир көйгөй бар: ал цикл аткарылган сайын жаңы ферментти толуктап турушу керек, бул операция кадамдарын бир аз татаалдаштырат жана аны толугу менен автоматтык түрдө күчөтүү кыйын.Бул маселе 1988-жылы окумуштуулар Thermus aquaticusдан Так ДНК полимеразасын кокустан бөлүп алгандан кийин чечилген. Ошондон бери ДНКны автоматтык түрдө күчөтүү реалдуулукка айланды.Бул ферменттин ачылышы даПЦРтехнология ыңгайлуу, практикалык жана универсалдуу технология.Учурда Так ДНК полимеразасы ДНК топтомдорундагы эң кеңири таралган полимераза болуп саналат.
2. PfuDNA
Жогоруда айтылгандай, Taq DNase чоң мүчүлүштүккө ээ, ошондуктан окумуштуулар дал келбегендиктен спецификалык эмес күчөтүүнү болтурбоо үчүн Taq ДНК полимеразасын белгилүү бир деңгээлде өзгөртүшкөн, натыйжада тесттин жыйынтыгы так эмес.Бирок Taq ДНК полимеразанын модификациясы бөлмө температурасында ДНК полимеразанын активдүүлүгүн токтото алат.PfuDNA полимераза Так ДНК полимеразанын жогорудагы кемчиликтерин толуктай алат, андыктан ПТР реакциясы нормалдуу түрдө жүргүзүлүшү мүмкүн жана максаттуу генди күчөтүүнүн ийгилигинин көрсөткүчү натыйжалуу жакшыртылышы мүмкүн.
3. Тескери транскриптаза
Тескери транскриптаза 1970-жылы ачылган. Бул фермент РНКны шаблон катары, dNTP субстрат катары колдонот, базалык жупташуу принцибине ылайык жана 5′-3′ багытында РНК шаблонуна комплементарлык бир ДНК тилкесин синтездейт.Кайтарым транскриптаза негизинен ДНК же РНК шаблондорунун ДНК полимераза активдүүлүгүнө көз каранды жана ошондуктан 3′-5′ экзонуклеаза активдүүлүгүнө ээ эмес.Бирок ал RNase H активдүүлүгүнө ээ, ал белгилүү бир деңгээлде тескери транскриптаза синтезинин узактыгын чектейт.Жапайы тескери транскриптазанын ишенимдүүлүгү жана термостубилдүүлүгү төмөн болгондуктан, окумуштуулар аны да өзгөртүшкөн.
үчүнПЦРэксперименттер, негизги чыгымдалуучу материалдар: жеке ПТР түтүгү, 4/8 тилкелүү ПТР түтүгү, ПТР плиталары.
ЛабиоПЦР чыгымдалуучу материалдартөмөнкүлөргө ээартыкчылыктары:
ПЦР плиталары: Кеңири жылуулук циклинин шайкештиги;Жогорку контраст, скважинаны оңой аныктоо;жакшы флуоресценттик чагылдыруу;жакшыжылуулук берүү;Сертификатталган DNase, RNase, ДНК, ПЦР ингибиторлору жана сыналган пирогенсиз.
Жеке ПЦР түтүктөр: бууланууга туруктуу;жакшыжылуулук берүү;сонун оптикалык тунук; тастыкталган DNase, RNase, ДНК, ПЦР ингибиторлору жана сыналган пирогенсиз.
4/8 тилкелүү ПТР түтүктөрү: Ультра жука дубалдар;жогорку ачыктык;жакшы флуоресценттик чагылдыруу;фармацевтика тармагында, тамак-аш өнөр жайында жана молекулярдык биологияда колдоно алат; жогорку сапаттагы, таза PP материалы; тастыкталган DNase, RNase, ДНК, ПЦР ингибиторлору жана сыналган пирогенсиз.
Посттун убактысы: 09-09-2023